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女性阴道微生态是人体微生态系统的一部分，女性的阴道内有很多微生物，正常情况下以乳杆菌为主，形成一个动态平衡系统。疾病状态往往是由于这个平衡被打破，出现阴道微生态异常的状况。探知阴道微生态的变化，评估阴道感染的状况，是阴道感染诊治的先决条件。 近10年来，人们对阴道微生态在阴道感染的发病和治疗中所起的作用逐渐深入，阴道微生态诊断评价系统也应运而生。目前，我国建立了世界上首个临床应用的阴道微生态诊断平台，并且成功地应用于临床生殖道感染的诊治。随着阴道微生态诊断概念的升温，市场上出现了很多微生态诊断产品，如何开展阴道微生态诊断工作以指导临床，是我们临床医生关心的问题。 阴道微生态评价诊断有4个关键之处，下面逐一讨论。
1.阴道微生态诊断评价系统
此系统应该包括形态学诊断平台和功能学诊断平台两大部分，并以形态学为主。 不同生殖道感染可能有相同的症状，了解阴道微生物群的变化是临床的重要需求。那么，我们如何来评价阴道微生物群的变化呢？在阴道微生态平台出现之前，清洁度检查和阴道真菌检查几乎是阴道分泌物诊断的全部，这些检查提供了阴道白细胞数量的信息，提供了对真菌和滴虫的判定，并且给阴道菌群进行了大致的分类。但由于分辨率不够，提供不了更多的信息。 随着阴道感染研究的深入，人们发现阴道感染的多样性和复杂性。已知的较明确的阴道感染就包括滴虫性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病、细菌性阴道病、需氧菌性阴道炎、溶细胞性阴道病、萎缩性阴道炎。在这些阴道感染性疾病中，滴虫性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病使用病原体检出的方式诊断；细菌性阴道病有两个金标准，临床Amsel标准的关键在于线索细胞的评估，实验室诊断标准Nugent评分需要对阴道乳杆菌等细菌进行评价；需氧菌性阴道炎使用Donders评分进行诊断；溶细胞性阴道病需要对阴道菌群进行分析；萎缩性阴道炎需要排除其他炎症，这些诊断标准都离不开阴道分泌物的革兰染色显微镜检，对细菌的分析更是必须使用油镜显微镜检查，因此，阴道微生态的形态学诊断平台是必不可少的。 有些阴道炎症的诊断也需要对理化功能进行分析，比如细菌性阴道病的Amsel标准中要求对阴道分泌物的pH值进行检测。对于阴道菌群的功能是否正常依赖于对阴道分泌物的酶学检验。因此，要全面评价阴道的微环境，功能学检测也是十分重要的。 现在市场上存在着很多主打微生态检测的产品，有些包括形态学诊断平台和功能学诊断平台，有些只包括功能学诊断平台。在构建微生态诊断平台时，我们应该注意，必须包含形态学诊断平台，如果功能学诊断平台的结果与形态学诊断平台的结果有矛盾，应以形态学诊断平台的结果为准。
2.阴道微生态诊断评价的形态学诊断平台
此平台应包含对菌群的评价、致病微生物的检测以及疾病状态评估3个部分。 阴道微生态的形态学诊断平台需要包含对病原体的评价，主要评价的病原体是真菌和滴虫，这部分病原体的评价，使用湿片（×400）和革兰染色（×1000）均可以完成。对于真菌的检测，应该对真菌菌丝、芽生孢子、孢子进行分别评价。 阴道微生态的形态学诊断平台还需要包括对于阴道菌群的评价，需要使用革兰染色（×1000），描述菌群的内容包括菌群的密集度、多样性、优势菌等方面，并应该描述是否存在菌群抑制或菌群增殖过度的状况。 阴道微生态形态学诊断平台还应包括细胞水平的分析，是否存在白细胞、脓细胞、中毒颗粒白细胞，对于评价机体的炎性反应十分重要。如果准备使用Amsel标准诊断BV，还应该观察是否存在线索细胞，诊断AV时，还需要观察外底层细胞。这部分评价，使用湿片（×400）和革兰染色（×1000）均可以完成。 阴道微生态形态学诊断平台可以纳入多种评分系统。诊断细菌性阴道病，通常有两个金标准方法，除了临床Amsel标准，还可以使用Nugent评分进行诊断，Nugent评分使用对阴道不同细菌的分析来诊断BV，相对客观。诊断需氧菌性阴道炎时需要使用Donders评分。纳入这些评分，有助于判断混合感染。
3.阴道微生态诊断评价的功能学诊断平台
此平台包括阴道酸碱度的测定、乳杆菌功能的评估、微生物代谢产物、机体炎性反应的检测。 阴道pH检测是阴道微生态功能评价的最重要内容。pH不仅是Amsel标准诊断BV的条件之一，也是阴道菌群状况的直接指示，pH＞4.5往往提示乳杆菌功能欠佳，存在混合感染的可能性。 过氧化氢分泌情况是阴道微生态功能学检测平台的另一重要内容，是评价乳杆菌功能的重要指标，代表乳杆菌对其他微生物的抑制作用，阴道菌群形态正常但过氧化氢分泌下降提示阴道菌群未能发挥正常的功能。 炎性反应指标通常采用白细胞酯酶，这种酶在白细胞破裂时释放，结合阴道白细胞计数，可以分析阴道的炎性反应。 微生物的代谢酶数量众多，厌氧菌生长活跃时常常出现唾液酸酶阳性；需氧菌大量繁殖时有可能会分泌β-葡萄糖醛酸酶；真菌和滴虫也有部分会分泌一些特定的酶。酶学检测的问题在于，酶的阳性与否并不是阴道炎诊断的必要因素，以BV为例，大约90%的BV患者会出现唾液酸酶阳性，但是唾液酸酶阳性的患者并不一定都是BV。因此，酶学检验只能作为形态学检验的重要补充，有助于我们判断感染的严重程度以及混合感染等特殊情况，不能否定形态学诊断。
4.阴道微生态诊断评价系统需要做好质控
开展阴道微生态检测的过程中，质量控制也是我们需要关注的内容。采样时需要采集阴道侧壁上1/3的分泌物，必须使用干棉签，使用精密pH试纸，革兰染色需要使用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的标准株进行染色质控，这些都是需要每日关注的地方。微生态检测中心需要建立质量控制与临床反馈平台，根据临床的需求，不断改进。（参考文献略）
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发表于 2017-9-22 08:13:55
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发表于 2017-10-11 16:46:29
